尘螨诱导的特异性皮炎模型制备方案

尘螨诱导的特异性皮炎模型制备

背景简介：

特应性皮炎（Atopic Dermatitis, AD）是一种慢性或慢性复发性瘙痒性炎症性皮肤病，这种由T细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞及其他细胞感染的皮肤病变关联，暗示其潜在的复杂免疫功能障碍有关。该疾病病因复杂，研究者对AD病因大致归结为遗传因素、感染性因素、变应原、心理因素等。研究表明,吸入性变应原尤其是尘螨(House dust mite)是人和动物AD的一个重要诱因。尘螨引起AD的途径主要有两个:通过破坏皮肤屏障直接引起;通过内在性吸入尘螨过敏原引起这也解释了AD患者往往伴随有哮喘和过敏性鼻炎等其他过敏性疾病的原因。尘螨引起的AD可以通过减少和避免接触尘螨使AD的临床症状得到改善。

尘螨是一种常见的吸入性过敏原，能够诱导特应性皮炎、哮喘、过敏性鼻炎等炎症性疾病发生，主要变应原包括Der p1、Der f1和Blo t5等。这些变应原可以诱导Th2型免疫反应，导致皮肤炎症和瘙痒能够通过激活免疫系统引发AD样症状，表现为皮肤增厚、CD4⁺T和CD8⁺T淋巴细胞浸润，免疫学特点以Th2型免疫为主；且发现有神经纤维出现在肥大细胞周围，这可能说明神经系统与AD发病存在一定的关系。因此该模型可用来研究神经系统在AD发病中的作用。

小鼠特应性皮炎模型诱导：(注：以下方案源于文献，仅供参考)

1．实验动物：6-8周雌性C57BL/6J小鼠

2. 模型诱导：设置模型组（HDM）和对照组（NC）分别用粉尘螨和生理盐水经皮肤致敏。

1）麻醉小鼠，电动剃须刀剔去小鼠背部2cm x3cm范围麻毛发，用3M透明敷贴反复粘贴小鼠背部皮肤6次，破坏皮肤屏障。

2）将浸湿了粉尘螨过敏原浸液（10mg/ml,100ul/次）或生理盐水的滤纸片（1x1cm²）贴敷与小鼠背部皮肤并用无菌纱布固定，持续贴敷48小时。

3）分别在第1、4、7周经皮致敏，2次每周，7周后结束，处死小鼠，进行检测。处死小鼠前，取眼眶血，用于IgE水平检测。

3.模型评估

1）皮肤组织病理检测

模型组小鼠背部皮肤可见明显的红斑、结痂和鳞屑，对照组皮肤基本正常。皮损处组织病理可见模型组小鼠表皮角化不全伴浆痂、、棘细胞层明显增厚并伴有真皮层较多炎症细胞浸润。

图.1 特异性进程小鼠皮损及组织病理表现

2）免疫学炎症改变

与对照组相比，模型组小鼠外周血总IgE水平升高。，皮损内嗜酸细胞趋化因子表达显著升高，皮损处Th2相关细胞因子IL-4和IL-13显著升高。

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