细胞支原体污染PCR检测试剂盒 产地:美国Southern Biotech Associates,Inc. （SBA） 产品信息： 中文名称 | 英文名称 | 货号 | 规格 | 支原体PCR检测试剂盒 | Mycoplasma Detection Kit | 13100-01 | 50T |
产品特点： - 用于特异性检测细胞培养液中支原体的污染
- 用于扩增支原体基因组中16S rRNA编码区
- 特殊的引物设计扩增用于覆盖支原体的三大类（Mycoplasma,Acholeplasma and Ureaplasma）,因此可检测超过95%的潜在的细胞污染。
- 检测方法简单，3小时内出结果。
- 检测灵敏度高：可检测到100ul细胞上清液中2-5毫微微克的支原体DNA。
- 特异性高，只扩增细胞培养液中支原体DNA，而真核细胞和细菌的DNA被扩增。
- 试剂盒带有阳性对照用于验证PCR体系的稳定性。
- 试剂盒内带有内参对照，用于排除PCR抑制剂引起的假阴性。
试剂盒用于扩增的支原体种属及对应PCR产物对照片段 支原体种属 | PCR产物片段(bp) | A.laidlawii | 611 | M.arginini | 448 | M.arthritidis | 486 | M.bovis | 605 | M.cloacale | 459 | M.falconis | 458 | M.faucium | 479 | M.fermentans | 579 | M.genitalium | 464 | M.hominis | 448 | M.hyorhinis | 525 | M.hyosynoviae | 471 | M.opalescents | 573 | M.orale | 503 | M.pirum | 533 | M.pneumonia | 493 | M.salivarium | 482 | M.synoviae | 572 | U.urealyticum | 558 |
结果分析： - 细胞如被支原体污染，可扩增到448-611bp一条或多个条带
- 样本中包含内参的DNA将会扩增出270bp的PCR片段（见图，泳道7），该扩增表明实验系统可靠性。
- 如在一些样品中扩增不到内参(270bp)，这种情况下可设置阴性对照（样本为水），可扩增到270bp的条带。
- 如果样品中含有PCR的抑制剂，可通过DNA提取去除。
- 如果细胞发生严重的支原体污染，448-611bp扩增产物将聚集或270bp的内参将消除（见图，泳道6）
- 低于100bp的低浓度片段，表明是二聚体或非特异性片段，而非阳性结果，这种情况不影响检测结果的精度。
检测结果示例： Lane1:大肠杆菌基因组扩增结果 Lane2:杂交瘤细胞DNA扩增结果 Lane3:阴性对照（水） Lane4:阳性对照 Lane5:抑制剂样本 Lane6:严重支原体污染的细胞 Lane7:轻度支原体污染的细胞 Lane8:100bp DNA ladder |
