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人白介素6 ELISA试剂盒
产品简介:

中文名称人白介素6 ELISA试剂盒
英文名称Human cytochrome C ELISA ELISA Kit
样本血清、血浆、细胞培养上清
检测范围6.25Pg/ml-200Pg/ml
灵敏度2pg/ml
规格48T/96T/2X96T

产品型号:

更新时间:2024-10-11

厂商性质:代理商

访问量:659

服务热线

01084640949

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产品介绍

人白介素6 ELISA试剂盒

用途人IL-6 ELISA试剂盒用于体外定量检测人血清,血浆,缓冲液或细胞培养液中的白介素6。此试剂盒只用于科研,不能用于诊断。

检测原理:

IL-6试剂盒应用的是夹心法固相酶联免疫吸附分析法(ELISA)。IL-6特异单克隆抗体被包被于微孔板上,已知IL-6浓度的标准品和未知浓度的样品可在此反应孔中进行检测。先将IL-6抗原和生物素标记IL-6特异单克隆抗体同时孵育。洗涤后加入亲和素过氧化物酶,孵育后洗去未结合的酶。其后加入底物,产生颜色反应,颜色的深浅与样品中IL-6的浓度成一定的比例关系。


试剂盒组成及配制:

 

试剂(2-8保存)

1x96孔的配置

产品编号:#950.030.096

 

配制

96T微孔板

1

即用型(已包被)

塑料板盖

2


标准品:200pg/ml

2

按瓶上的说明稀释(见试剂制备)

标准品稀释缓冲液(Buffer

1瓶(25ml

10x浓度,用纯水稀释。(见试剂制备)

标准品稀释液液(Human   serum

1瓶(7ml

即用型

对照

2

按瓶上的说明稀释(见试剂制备)

生物素标记IL-6抗体

1(0.4ml)

用生物素标记抗体稀释液稀释(见试剂制备)

生物素标记抗体稀释液

1(7ml)

即用型

亲和素-HRP

2(5ul)

0.5ml HRP稀释液预稀释(见试剂制备,)

HRP稀释液

1(23ml)

即用型

洗涤缓冲液

1(10ml)

200x,蒸馏水稀释(见试剂制备)

TMB

1(11ml)

即用型

H2SO4终止液

1(11ml)

即用型

 自备材料:

蒸馏水;加样器:10ul, 50ul, 100ul, 200ul, 1000ul; 漩涡振荡器和磁力搅拌器

保存条件:

试剂盒保存于2-8度,

 

样品收集,处理和保存:

1.       细胞培养上清:1000xg离心10分钟去除颗粒和聚合物。

2.       血清——操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000xg离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

3.       EDTA,柠檬酸盐和肝素血浆可用于检测。1000Xg离心30分钟去除颗粒。

4.       如果样品不直接使用,将其分为小部分(250-500ul-70下保存,避免反复冻融。

如果可能,不要使用溶血和高脂血。如果血清中有大量的颗粒,检测前先离心或过滤。

注意:不要在3756加热解冻。在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻

检测程序

使用前,将所有试剂充分混合,不要使液体产生泡沫。根据样品数量加上空白,标准品决定所需的板条,每个样品,标准品,空白和质控都应做双份。

详细步骤

1

制备标准曲线

2

按实验方案在对应孔加入100ul标准品和样本,标准品,对照及空白(选择合适的标准品稀释液)所有孔均做复孔。

3

加入50ul稀释后的生物素标记的IL-6抗体到各孔

4

用塑料膜封板,室温(18-25)孵育1小时

5

去掉封板膜,按以下程序洗板:

a.  吸出孔内液体。

b.  每孔加入300ul1X的洗涤缓冲液

c.  吸出孔内液体

d.  重复步骤bc两次

6

加入100ul亲和素-HRP溶液到各孔

7

用封板膜,封板,室温(18-25)孵育30min

8

重复步骤5

9

加入100ul即用型TMB底物溶液至各孔

10

室温避光孵育12-15min,用铝箔包住反应板,   避免光照。

11

加入100ul   H2SO4终止液到各孔,终止反应。

在分光光度计中读取结果。450nm作为初始波长,620nm作为参考波长。





更多产品详情,请联系Diaclone 中国区总代理北京博蕾德生物科技有限公司。

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