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更新时间:2026-07-29
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简介:
线粒体是细胞能量代谢核心细胞器,线粒体 DNA(mtDNA)编码氧化磷酸化关键亚基,其转录过程直接调控细胞衰老、氧化应激、肿瘤代谢、线粒体遗传病发病机制。人体线粒体转录依赖人源线粒体 RNA 聚合酶(POLRMT/mtRNAP),搭配 TFAM、TFB2M 转录因子共同启动 LSP/HSP 线粒体启动子转录PMC。当前实验室开展体外转录重构普遍存在几大难题:
1)市面重组 mtRNAP 活性参差不齐,批量表达纯化难度高,杂蛋白、核酸酶污染干扰转录产物;
2)异源酵母/原核 mtRNAP与人源启动子识别存在物种差异,实验数据无法直接复刻人体生理机制;
3)单一酶蛋白货源稀缺,整套线粒体转录重组蛋白采购渠道分散,实验体系难以标准化;
微量转录产物易降解,搭配普通纯化柱回收率低,下游测序、功能检测无稳定样本。
针对线粒体生理、肿瘤代谢、衰老机制科研需求,美国Enzymax 推出#81 Human mtRNAP 人源线粒体 RNA 聚合酶,高活性重组纯化蛋白,搭配配套 mtTFA、mtTFB2 转录因子,可完整搭建人体线粒体体外转录体系,是线粒体方向顶刊实验标配工具蛋白。
产品优势:
1.人源全长重组蛋白,匹配人体线粒体启动子
区别酵母、啮齿类同源 mtRNAP,可精准识别人类线粒体轻链/ 重链启动子,实验结果贴合人体生理通路,避免物种差异带来的数据偏差。
2.高活性低杂酶污染,转录背景极低
严格多重质控去除核酸酶、蛋白酶杂质,微量体外转录也能获得清晰完整 RNA 产物,适配低丰度线粒体转录本分析。
3.整套线粒体转录蛋白配套齐全,一站式构建重构体系
同品牌同步提供 #82 mtTFA、#83 mtTFB2 核心转录因子,三者组合即可搭建完整人体线粒体体外转录系统,无需跨品牌搭配,体系重复性更高。
4.长期储存稳定性强,实验重复性佳
优化甘油保护缓冲液,-80℃稳定存放 12 个月,分装后多次取用酶活无明显衰减,适合长期大批量机制实验。
5.适配多下游实验,配套品牌纯化耗材无缝联用
转录完成后可直接搭配 EZCR304 RNA 纯化浓缩试剂盒、EZC107 微量 RNA 离心柱回收产物,用于 RNA 测序、5'RACE、转录起始位点鉴定。
产品应用:
1.人体线粒体体外转录体系重构(cat#81、#82、#83组合)
体外还原线粒体基因转录全过程,研究启动子识别、转录起始、流产转录、延伸调控分子机制,线粒体基础研究经典体外模型。
2.衰老、氧化应激线粒体稳态机制研究
探究氧化损伤、ROS 应激如何调控 mtRNAP 转录活性,解析衰老细胞线粒体转录抑制通路。
3.肿瘤代谢与靶向药物筛选
POLRMT 是肿瘤代谢关键靶点,利用 h-mtRNAP 体外体系筛选 POLRMT 小分子抑制剂,开发抗肿瘤候选药物。
4.线粒体遗传病致病机理解析
检测 mtDNA 突变、线粒体转录因子缺陷对 mtRNAP 转录效率的影响,阐释线粒体疾病发病分子机制。
5.NAD⁺修饰非经典帽结构 RNA 研究
mtRNAP 可高效生成 NAD⁺/NADH 修饰 5' 端 RNA,用于新型 RNA 表观修饰、转录组 5' 端图谱分析。
产品信息:
品牌 | 货号 | 产品名称 | 规格 | 用途 |
Enzymax | 81 | Human mtRNAP(线粒体 RNA 聚合酶) | 10ug | 线粒体转录核心催化酶,整套重构体系主力 |
Enzymax | 82 | Human mtTFA(TFAM 转录因子) | 10ug | DNA 折叠、启动子招募,提升转录起始效率 |
Enzymax | 83 | Human mtTFB2 | 10ug | 启动子解链、转录起始关键辅助因子 |
Enzymax | EZCR304 | RNA Cleanup and Concentration Kit | 50T | 转录后 RNA 纯化、脱盐浓缩,去除 NTP 与蛋白杂质 |
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