5' 端转录组利器｜Enzymax #88 RppH RNA 5' 焦磷酸水解酶

背景简介：

原核生物新生转录本、体外转录 RNA 天然携带5' 三磷酸基团（ppp-RNA），而 RNA 连接酶、5'RACE、5' 端高通量测序仅识别5' 单磷酸 RNA（p-RNA），三磷酸结构会直接阻断接头连接，大幅降低文库有效 reads、扩增无条带。

传统实验存在多重难题：

1.经典TAP 烟草焦磷酸酶供货不稳定，仅能处理真核带帽 mRNA，无法单独处理原核三磷酸转录本；

2.市面同类 RppH 杂酶污染严重，微量 RNA 极易降解，低丰度新生转录本回收率极低；

3.脱帽酶仅能去除真核 m⁷G 帽，无法处理无帽的 5' 三磷酸原核 RNA，两套酶体系分开操作流程繁琐；

4.酶储存稳定性差，反复冻融后活性断崖式下跌，大批量转录组实验重复性差。

针对原核转录图谱、nascent RNA 新生转录组、5'RACE、小 RNA 建库需求，美国Enzymax 推出#88 RppH 重组大肠杆菌 RNA 5' 焦磷酸水解酶，专一水解 RNA 5' 端焦磷酸，将 ppp-RNA 转化为可连接接头的 p-RNA，可与 #94 Tobacco Decapping Plus 2 脱帽酶联用，一次性同步处理真核加帽 mRNA + 原核三磷酸转录本，实现全转录本 5' 端同步分析。

产品优势：

1.专一水解 5' 三磷酸 RNA，可替代 TAP

特异性切除 ppp-RNA 末端焦磷酸基团，高效生成 5' 单磷酸 RNA，适配原核新生转录本、体外转录 RNA 处理，可直接替代停产 TAP 用于小 RNA 建库实验，数据可横向比对。

2.超高蛋白纯度，零杂酶干扰

重组蛋白严格纯化，无核酸酶、蛋白酶残留，微量低丰度 RNA 样本不会发生降解，保障 5' 端测序、RACE 实验低背景。

3.储存稳定性优异，长期实验重复性强

专用甘油稳定缓冲液，-80℃存放 12 个月酶活无明显衰减，分装后多次取用性能稳定，适合大批量转录组样本批量处理。

4.可与脱帽酶联用，一站式全转录本处理

搭配 #94 Tobacco Decapping Plus 2 全能去帽酶，同步完成真核加帽 mRNA 脱帽、原核三磷酸 RNA 去焦磷酸，统一转化为 5' 单磷酸 RNA，一套流程搞定真核 + 原核样本。

5.适配下游全套纯化耗材，无缝衔接实验

酶促反应结束后，可直接使用 EZCR304 RNA 纯化浓缩试剂盒、EZC107 微量 Tini 柱回收 RNA，去除酶、盐离子杂质，高效保留微量转录本。

产品应用：

1.原核新生转录本 dRNA-seq、5' 端转录起始位点图谱分析（核心应用）处理细菌原生无帽 5' 三磷酸 mRNA/sRNA，转化为单磷酸 RNA 后连接测序接头，富集真实转录起始片段，精准定位启动子区域。

2. 5' RACE 全长基因克隆（搭配 #94 脱帽酶黄金组合）真核 mRNA 经 #94 脱帽、原核转录本经 #88 RppH 去焦磷酸，全部生成 5' 单磷酸 RNA，大幅提升接头连接效率，稳定扩增全长未知 5' 端序列。

3.小RNA 高通量测序文库构建替代传统 TAP 酶处理三磷酸化小 RNA，提高小 RNA 克隆效率，用于线虫、细菌小 RNA 转录组研究。

4. RNA 降解、mRNA 稳态分子机制体外重构模拟细菌体内 RppH 介导的 5' 端依赖 RNA 降解通路，解析 RNA 结合蛋白、核酸酶调控 RNA 稳定性机制。

5.体外转录、mRNA 疫苗原料质控体外转录产物去除 5' 三磷酸基团，用于人工帽类似物、非经典 NAD⁺修饰 RNA 的酶活验证与功能检测。

产品信息：

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