试剂解析丨双链RNA检测金标准：抗双链RNA单克隆抗体J2

更新时间：2026-10-14

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本文导读

① J2说明书速查：抗体基础信息和使用要点；

② 五大应用方向：从病毒复制检测到mRNA制剂杂质分析；

③ J2 / K1 / K2 三款抗dsRNA抗体对比。

双链RNA（dsRNA）抗体常被用于识别、研究两类动植物病毒：一类基因组本身就是dsRNA，另一类在复制阶段会生成dsRNA复制中间体。

J2抗双链RNA单克隆抗体是双链RNA检测的金标准。

J2最早只用于植物病毒研究。2006年Weber等人用J2证实——正链RNA病毒感染细胞后会大量生成双链RNA复制中间体。此后，该抗体广泛用于动植物病毒研究。

图1 J2抗体Fab片段与dsRNA结合（图源Bou-Nader et al.,2026）

PART

说明书速查

J2参数

项目

参数

克隆号

亚型

IgG2a kappa

产品类型

单抗

货号 · 规格

10010200（200μg）／10010500（500μg）

形态

冻干

纯度

凝胶电泳纯化的IgG抗体，A280=1.47对应抗体浓度1mg/mL

纯化方式

200μg：蛋白G亲和层析；500μg：蛋白A-琼脂糖亲和层析

运输条件

室温

储存

可在-20 ℃ 或-70 ℃保存十年，禁止反复冻融；加入10 mM NaN₃后可在4 ℃短期存放；复溶后分装并于-20 ℃或-70 ℃冷冻保存

抗原识别特性

识别长度≥40bp的dsRNA，识别不依赖靶标RNA的碱基序列及组成

适用实验

斑点印迹、dsRNA免疫印迹、免疫亲和层析、免疫电镜、ELISA、ICC、IF、IHC

应用说明

dsRNA免疫印迹前，核酸分离必须使用聚丙烯酰胺凝胶电泳；用琼脂糖凝胶转膜后检测灵敏度会显著下降，需自行做梯度滴定确定适合工作浓度

使用说明

10010200加入200μL无菌蒸馏水复溶；10010500加入500μL无菌蒸馏水复溶；

复溶后为浓度1mg/mL的PBS缓冲液，无稳定剂、防腐剂。

注意事项冻干会产生少量变性蛋白聚集体，容易造成 IF/IHC 高背景；复溶后高速离心，取上清使用。

J2适用实验

Figure A-D

A. 斑点印迹：J2可检测体外合成dsRNA、天然dsRNA【图源de Faria et al., 2023】

B. 免疫电镜：J2免疫金标记示踪TuMV感染本氏烟木质部导管，囊泡富集dsRNA黑点【图源Wan et al., 2015】

C. 免疫荧光：J2检测SINV感染细胞，dsRNA（红色），DAPI标记细胞核（蓝色）【图源Wan et al., 2015】

D. 免疫组化：J2标记感染了传染性软疣病毒的皮肤组织（棕褐色）【图源Thomsen et al., 2023】

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应用方向

APPLICATIONS

在培养细胞以及石蜡包埋组织切片中检测多种病毒产生的dsRNA复制中间体，包括丙型肝炎病毒、登革病毒、鼻病毒、基孔肯雅病毒、狂犬病毒、脊髓灰质炎病毒、猪瘟病毒、雀麦花叶病毒等；
研究宿主抗病毒免疫应答的启动机制，解析病毒的免疫逃逸策略；
对病毒核酸复制位点开展超微结构定位，解析病毒生命周期；
辅助区分未知病原体属于病毒 / 细菌；
检测体外合成 mRNA 制剂中的dsRNA杂质（基因治疗相关研究）。

J2的价值不只于“检测病毒"它让研究者能在细胞与组织原位“看见"dsRNA 复制中间体的存在，从而把病毒生命周期、宿主免疫启动与免疫逃逸研究落到实验层面。

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三款抗 dsRNA 抗体对比

J2 VS K1 VS K2

克隆号	J2（金标准型）	K1（J2替代型）	K2（IgM专用型）
规格 · 货号	200μg: 10010200 500μg: 10010500	200μg: 10020200 500μg: 10020500	5mL: 10030005 10mL: 10030010
抗体亚型	IgG2a kappa		IgM kappa
剂型	纯化抗体冻干粉		杂交瘤培养上清液体
纯化	200μg: 蛋白G亲和层析；500μg: 蛋白A-琼脂糖亲和层析	蛋白A-琼脂糖亲和层析	未经过纯化
浓度	复溶后1.00mg/mL （A280nm=1.47对应1mg/mL）		未稀释杂交瘤上清，无明确蛋白浓度；夹心ELISA 建议用PBS 以1:2稀释
配方体系	复溶后为 PBS 缓冲液，无稳定剂、防腐剂		RPMI 基础培养基 + 5% 胎牛血清；无防腐剂
注意事项	冻干会产生少量变性蛋白聚集体，容易造成IF/IHC高背景；复溶后高速离心，取上清使用		直接稀释使用；最佳工作稀释比例需通过梯度滴定确定
抗体来源	雌性DBA/2小鼠腹腔免疫：50μg L-dsRNA+75μg甲基化牛血清白蛋白，CFA乳化；多次加强免疫后，取脾细胞与Sp2/0-Ag14骨髓瘤细胞融合，筛选获得杂交瘤克隆
抗原识别共性	识别长度≥40 bp的dsRNA；识别不依赖靶标RNA的碱基序列及组成；可识别所有被测天然dsRNA、poly(I)·poly(C)、poly(A)·poly(U)
亲和力差异	对poly(I)·poly(C) 亲和力比天然dsRNA约低10倍	整体亲和力与J2接近；对poly(I)·poly(C)亲和力显著高于 J2，是检测 PolyI:C 的优选	高亲和力结合所有类型dsRNA
适用实验	斑点印迹、dsRNA免疫印迹、免疫亲和层析、免疫电镜\ELISA、FCM、ICC、IHC、IF；支持夹心ELISA（dsRNA定量）	斑点印迹、dsRNA免疫印迹、免疫亲和层析、ELISA、FCM、ICC、IHC、IF	支持夹心ELISA（dsRNA 定量）

选型建议

· 常规dsRNA检测认准J2金标准；

· 若靶标是poly(I)·poly(C)，K1亲和力更高、是检测polyI:C的优选；

· 需要做dsRNA定量夹心ELISA时，优先考虑IgM型K2。

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