试剂解析丨免疫荧光常用工具TrueBlack®，高效淬灭脂褐素自发荧光

更新时间：2026-10-19

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Biotium

TrueBlack® 脂褐素自发荧光淬灭剂

染色前／染色后双阶段可用，把被脂褐素“吃掉"的荧光信号还给你

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苏丹黑B 的升级替代　·　广谱自发荧光淬灭　·　多色荧光实验友好

做免疫荧光时，你是否也遇到过——

× 抗体验证没问题、流程全规范，镜下满是颗粒状杂荧光，定位无从下手；

×没加荧光二抗，片子却自行“发光"，真实阳性信号被脂褐素自发荧光掩盖，红 / 远红外通道没法用；

×传统苏丹黑B虽能压制绿色脂褐素，却引入严重红／远红外非特异背景，直接限制多色实验开展。

√今天推荐 Biotium™ TrueBlack® 脂褐素自发荧光淬灭剂——苏丹黑B 的优质替代，专治组织切片自发荧光的老大难问题。

文章导读 · READING GUIDE

①脂褐素为何成为免疫荧光的“隐形杀手"；
②TrueBlack® 六大核心优势与多色实验适配性；
③初代 vs Plus 选型指南，不能错过的产品Q&A。

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什么是脂褐素？为何干扰荧光成像

自发荧光来源

脂褐素是衰老细胞溶酶体内氧化蛋白-脂质复合物颗粒，广泛积累于人脑、视网膜及老年动物组织，在荧光显微镜所有通道产生广谱自发荧光。

不做淬灭处理，信噪比会严重下降，甚至无法识别特异性染色信号，导致大量免疫荧光实验难以推进。

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TrueBlack® 的六大核心优势

产品特点

✨ 科研人为什么把它作为免疫荧光“标配"

01消除脂褐素产生的自发荧光；

02降低胶原蛋白、弹性蛋白、红细胞等其他来源自发荧光，改善整体背景；

03染色前或染色后均可处理，对荧光标记抗体、核染料信号干扰极小；

04适用于人体组织、老年动物组织的荧光成像；

05操作快速简便、效果稳定，兼容常用湿式／硬质荧光封片剂，玻片可长期保存；

06也用于细胞培养支撑材料——聚碳酸酯滤膜的荧光淬灭。

一、消除脂褐素自发荧光，为成像扫清障碍

传统实验一般使用苏丹黑B淬灭脂褐素自发荧光，但本身会产生非特异性红、远红外背景，限制该波段染料使用。TrueBlack®作为优质替代，淬灭自发荧光的同时背景信号更低。

图1 成人脑组织切片多通道脂褐素自发荧光淬灭效果对比

第一排：未处理组中，脂褐素表现为多种通道明显发光的荧光颗粒；

第二排：苏丹黑B 淬灭部分荧光，却在红、远红外通道产生强烈背景；

第三排：TrueBlack® 淬灭荧光且几乎不引入额外背景。

苏丹黑B

可淬灭部分脂褐素荧光

但在红／远红外通道引入强烈背景

TrueBlack®

有效淬灭脂褐素荧光

几乎不引入额外背景信号

二、抑制多来源组织自发荧光，改善整体背景

TrueBlack®不仅针对脂褐素，还可减少非脂褐素来源的自发荧光（如细胞外基质、血细胞），并降低非人类组织中的自发荧光，整体提升成像洁净度。

图2 人肾组织切片多通道自发荧光淬灭效果对比

上排：未处理组可见细胞外基质与血细胞等多种来源的自发荧光；

下排：经 TrueBlack® 处理后，上述自发荧光显著降低。

图3 大鼠肾组织切片自发荧光淬灭效果对比

左图：未处理组织可见细胞外基质产生的绿色自发荧光，DAPI（细胞核，蓝色）；

右图：绿色自发荧光被 TrueBlack® 淬灭。

三、染色前／染色后都能用

TrueBlack®的灵活性在于——无论免疫染色前预处理，还是染色完成后处理，都能淬灭脂褐素且不干扰特异性染色信号。

图4 人大脑皮层组织切片（染色前处理）脂褐素自发荧光淬灭效果对比

用 CF®488A 标记抗 NeuN 抗体标记神经元胞核（绿色），DAPI 标记细胞核（蓝色）。

左图：未处理组脂褐素呈白色斑点；

右图：染色前预处理可淬灭自发荧光，不影响特异性信号。

图5 人脑组织切片（染色后处理）脂褐素自发荧光淬灭效果对比

用兔抗 GFAP 抗体与 CF® 640R 标记山羊抗兔二抗标记胶质细胞（品红色），DAPI 标记细胞核（蓝色）。

左图：未处理组脂褐素自发荧光位点以箭头标注；

右图：染色后处理可淬灭自发荧光，不影响特异性信号。

注意

若同时搭配 TrueBlack® IF 背景抑制试剂盒：因 IF 试剂盒含去污剂，脂褐素淬灭试剂只能放在免疫染色之后使用；若免疫染色缓冲液不含去污剂，则染色前／染色后任选。

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文献验证：不止于组织切片

应用拓展

《Biological Procedures Online》期刊中，作者使用 TrueBlack® 脂褐素自发荧光淬灭剂优化血液中循环肿瘤细胞（CTCs）、骨髓中播散肿瘤细胞（DTCs）的成像质量，实现稀有细胞的多靶点检测与细胞形态学分析。

文献源自：Axelrod HD, et al. Biol Proced Online, 2018, 20:13. PMID:29988526

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初代 vs Plus 怎么选

型号对照

选择建议

1. 普通石蜡切片，脂褐素强，主要看绿光／蓝光通道，可以接受乙醇处理，选 23007，文献方案成熟，结果稳定。

2. 厚切片、冰冻组织、怕乙醇收缩，重点采集红光、远红光通道，选 23014 Plus。

关键避坑

初代与 Plus 均与有机溶剂型封片剂不兼容！请务必选择水相封片剂。

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科研人最常问的 4 个问题

Q&A

Q1　作用原理是什么？

机理与传统苏丹黑B 相近：脂褐素是溶酶体内氧化蛋白-脂质混合颗粒，具广谱自发荧光。TrueBlack® 属疏水性染料，结合富含脂质的脂褐素颗粒，从而淬灭其自发荧光。

Q2　能否用于脂褐素的显色染色？

不可以。该产品面向荧光成像下淬灭自发荧光，并非普通光镜下的组织化学染色试剂，不能用于脂褐素的显色观察。

Q3　23007 与 23011 版本有何区别？

两个版本染色淬灭性能一致，仅储备液溶剂、浓缩倍数不同，稀释使用后实验表现无差异。

Q4　红细胞、细胞外基质的淬灭为何不稳定？

该试剂并非专门针对红细胞／ECM 开发。此类非脂褐素自发荧光的淬灭效果受组织固定方式、切片厚度、孵育时间影响较大，不同批次样本波动较明显。

本文内容整理自 Biotium™ 技术资料，仅用于科研交流，不可用于人体或临床治疗。