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实验方案丨DSS诱导结肠炎模型

更新时间:2026-11-02点击次数:6

导读 · CONTENTS

① DSS 试剂基础参数速查;
② 造模动物品系选型、易感性影响因素;

③ 急性/慢性造模方案;
④ 肠道屏障通透性检测与高频 FAQ。

哺乳动物胃肠道处于“可控性炎症"状态,平衡一旦被打破,在多重因素共同作用下,会诱发炎症性肠病(IBD),包括溃疡性结肠炎(UC)、克罗恩病(CD)等。

DSS可破坏结肠上皮屏障,诱发肠道炎症,从而引发结肠炎。

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图1 DSS诱导肠炎

(图源 Al‑Failakawi A et al., Biomolecules, 2024)

DSS诱导结肠炎模型,因其可重复性高、表型与人类溃疡性结肠炎高度相似,成为 肠炎造模领域金标准 。


01

PART

 

基本信息

DSS OVERVIEW

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注意

DSS是多聚阴离子葡聚糖衍生物,带有大量负电荷,加入阳离子类化合物会发生相互作用结合,产生沉淀。


02

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动物品系推荐

MOUSE STRAINS

小鼠品系

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大鼠品系

大鼠常用SD和Wistar

易感性影响因素

  • 小鼠周龄:推荐6~12周龄,造模效果稳定可重复;
  • 性别差异:推荐雄性;雌性发病程度较轻,急性炎症后恢复更快;
  • 肠道菌群:易感程度无菌小鼠>SPF小鼠>普通环境饲养小鼠;
  • 饮食:高碳水、高脂饮食会提升结肠炎易感性。

03

PART

 

造模方案

MODELING PROTOCOL

慢性结肠炎模型(自由饮)

  • 选取成年小鼠正常饲养1-2周;
  • 2-3%DSS自由饮5-7天观察症状体征;
  • 停止饮用DSS,改正常饮水7-14天;
  • 重复两轮2-3步操作;
  • 每1-2天需更换一次新配置的DSS溶液。
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图2 DSS诱导慢性结肠炎小鼠模型

(图源 Holman JM et al., mSystems, 2023)

急性结肠炎模型(自由饮)

  • 选取成年小鼠正常饲养1-2周;
  • 2-5%DSS自由饮5-7天观察症状体征;
  • 每1-2天更换一次新配置的DSS溶液。

急性结肠炎模型(灌胃)

  • 每天分别于10:00, 14:00和18:00给予小鼠2%DSS溶液灌胃,每次30ml/kg,不另予饮水;
  • 每天末次灌胃后给予足量混合配方颗粒饲料,次日8:00取走饲料;
  • 灌胃持续9天。

Balb/c小鼠造模(急性-自由饮)

2.5 % DSS:35天,无死亡,无肉眼血便;但可观察到肠道炎症、结肠长度缩短、脾脏重量改变、粪便异常。

5 % DSS:炎症严重程度持续上升,病理表现高度模拟人类溃疡性结肠炎;7天后出现直肠出血、结肠缩短、动物死亡情况。


造模要点

  • DSS几乎不影响小鼠正常饮水量;
  • 调整DSS浓度或给药时长,可以调控炎症损伤轻重;
  • 造模评价指标:生存天数、体重变化、粪便性状、结肠长度、直肠出血、肠道组织形态、脾脏重量、肠道通透性等。
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图3 结肠炎造模评价指标前后对比

(图源 Chassaing B et al., Curr Protoc Immunol, 2014)


04

PART

 

肠道通透性检测

BARRIER PERMEABILITY

DSS损伤结肠上皮屏障,肠道屏障通透性升高 。

两条转运通路

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细胞旁通路(绿色箭头)

FITC-Dextran示踪,

代表细胞间隙通透,

紧密连接被破坏。

VS

跨细胞通路(黑色箭头)

D-木糖(D-Xylose)示踪,

代表上皮细胞载体介导转运,

反映细胞存活与转运功能。


通透性检测试剂

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通透性检测:更多 肠道通透性检测 详细内容,请看上篇《试剂解析丨细胞旁通透性定量示踪工具——荧光标记葡聚糖》


05

PART

 

模型用途

APPLICATIONS

 发病机制研究

研究炎症性肠病的发病机制:保护性免疫通路的调控作用;

 肠癌模型构建

研究遗传、环境致癌因素:结合结肠致癌物氧化偶氮甲烷(AOM),构建慢性结肠炎相关的肠癌模型;

 屏障机制研究

研究肠道屏障功能机制:DSS诱导急性结肠炎不需要功能完整的T、B淋巴细胞,适合研究固有免疫在黏膜屏障防御中的作用;停止给DSS后,还可以研究黏膜修复愈合过程;

 药物筛选和药效评价

干细胞疗法、各类IBD候选药物的筛选;药物与细胞制剂的治疗效果评价。


06

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FAQ

常见问题解答

Q:DSS的分子量对结肠炎模型的构建有什么影响?

A:40-60 kDa是建立结肠炎模型的最佳DSS分子量范围。分子量过低,DSS的炎症诱导作用较弱;分子量过大,则难以吸收。

Q:不同批次对实验有什么影响?

A:DSS是葡聚糖聚合物,所示分子量为平均分子量,不同批次之间会有分子量差异,而分子量对肠炎造模有影响。通常,批间较稳定,但是也有少部分批间差明显,建议根据实验需求,购买同一批次的足量DSS或者换用批次之前都先进行预实验。

Q:小鼠饮用3%的DSS,7天后都没有出现明显症状,怎么解决?

A:肠炎模型造模是否成功以病理切片判定。如果7天未出现明显症状,则重新进行实验,并增加0.5-1%的DSS的饮用浓度。

Q:DSS饮用后体重下降明显,但是为什么病理切片HE染色没有炎症现象?应取肠段的哪一部分作为样品?

A:DSS的饮用达到一定阈值才能成功诱导肠炎,阈值如果达不到,会出现体重下降,但是病理无炎症表现的情况。建议取直肠远端附近1-2cm段。

Q:为什么慢性肠炎模型的第二个周期饮用相同浓度的DSS,动物出现的症状没有第一个周期明显?

A:动物饮用DSS一段时间后会有耐受性,所以第二个周期出现症状减弱为正常现象。

Q:DSS造模期间是否可以进行不同时间点的检测,观察DSS饮用前期什么时间会造成上皮屏障破坏?

A:可以,一般2天造成上皮屏障破坏,可以选择3、5、7天,进行病理检测。

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本文所用的 DSS 与 荧光标记葡聚糖,博蕾德现货供应!

肠炎诱导试剂 DSS

· TdB Labs(DB001)

· MP Biomedicals(02160110)

· Chondrex(4015)

屏障通透性检测试剂

Chondrex™ FITC/TRITC-Dextran(4013/4009/4014/)、D-Xylose Assay Kit(6601)

本文涉及试剂仅用于科研,不得用于人或动物的诊断、治疗操作!


TdB一级代理,博蕾德现货供应

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