EAE模型操作流程一、实验试剂：
| 实验试剂 | 规格 | | MOG35-55（Hooklabs ,cat#DS-0111购自：北京博蕾德生物） | 1ml (2mg/ml) | | 百日咳毒素PTX（List Labs,cat#181 购自：北京博蕾德生物） | 50μg | | 结核杆菌（BDDifco，cat#231141购自：北京博蕾德生物） | 6x100mg | | 弗氏不*佐剂（Chondrex, cat#7002购自：北京博蕾德生物） | 5ml | | 成年雌性C57/BL6小鼠 | ----------------------- |
二、实验耗材：
1）无菌陶瓷研钵1个
2）5ml玻璃注射器
3）振荡器
4）28G一次性注射针头
5）18G一次性注射针头
6）1ml一次性注射器
7）一次性三通管1个
8）一次性塑料试管
三、实验周期：约2周
四、试剂配制：
1.少突胶质细胞髓磷脂糖蛋白（MOG）准备：
1）准备*弗氏佐剂（CFA）：结核菌素（Mtb）粉末溶于不*弗氏佐剂而成（终浓度为4mg/ml）。将100mg结核菌素粉末与不*弗氏佐剂混合，每次加入一点点不*弗氏佐剂，在研钵中充分研磨保证结核菌素*悬浮。
PS:也可直接购买即用型的*佐剂（Chondrex cat#7001 4mg/ml ,购自北京博蕾德生物科技有限公司）
2）MOG35-35：即用型-20℃保存。
3）1:1混合MOG和Mtb/CFA（终浓度为1mg/ml）。使用三通管使之混合和乳化，保存于4℃冰箱，并于24小时内使用
2、百日咳毒素（PTX）：50μg毒素和500μl PBS做成浓度为100μg/ml体系，保存于4℃冰箱。使用时按1:100稀释（终浓度为1μg/ml），腹腔注射200μl/只小鼠
五、步骤：
1、*天：小鼠胸腹部皮下注射接种MOG和Mtb/CFA（终浓度为1mg/ml）混合液：腹侧2-4个点，共150μl/只。再腹腔注射百日咳毒素（PTX），200μl/只小鼠
2、第三天：腹腔内注射百日咳毒素（PTX），200μl/只小鼠。
以上EAE模型-(制备全套试剂，北京博蕾德均有现货库存。欢迎咨询。
参考文献:
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6.SATB1 is required for the development of experimental autoimmune encephalomyelitis to maintain T cell receptor responsiveness.Akiba, Y;Kuwabara, T;Mukozu, T;Mikami, T;Kondo, M;
Microbiology And Immunology February 1, 2018 |
